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嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒規格

產品簡介

嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒規格
上海聯祖生物相關產品:
MSA檢測試劑盒濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

更新時間:2021-03-13
訪問次數:556
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱

 Streptococcus thermophilusPCR

 貨號

 LZP7344

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Rubrisandrin A乙酸仲丁酯 99%4--1-甲基-1H-吡唑 97%

Savinin乙酸仲丁酯 97.5%4--1H-咪唑 97%

Schineolignin B乙酸叔丁酯 99%4-乙酰氧基吲哚 99%

Schisandrin CS-叔丁基-L-半胱氨酸鹽酸鹽 98%甲氨基乙鹽酸鹽 98%

Schisandrin C epoxide叔丁酯 98%反-8-甲基-6-壬酰氯 97%

Schisandrone解毒喹 分析標準品3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯 99%

Schisanhel戊二酸二甲酯 98%3-氨基-2-甲氧基吡啶 98%

Schisanligne A己二酸二甲酯 AR,≥99%4-硝基吲哚 98%

Schisanligne C馬來酸二丁酯 97%5-嘧啶 99%

Schisanligne D琥珀酸二甲酯 98%1-(4-吡啶基)哌 97%

Schisantherin A琥珀酸二甲酯 AR,99%2,4-二羥基喹啉 97%

Schisantherin B琥珀酸二乙酯 98%2-喹喔啉羧酸 97%

Schisantherin C癸二酸二甲酯 97%(2R)-(-)-縮甘油基對甲苯磺酸酯 97%

Schisanwilsonin H馬來酸二乙酯 96%(2S)-(+)-縮甘油基對甲苯磺酸酯 98%

Schisanwilsonin I馬來酸二烯酯 97%替扎尼定 98%

Schizandrin A鄰苯二甲酸二乙酯 AR,99.5%5,6,7,8-四氫-2-甲基喹啉 98%

1-十一烷基磺酸鈉[離子對色譜級]Phospho-IRS-1 (Ser302) (34C7) Rabbit mAbPhospho-cdc25A (Ser124)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體

1-十二烷基磺酸鈉[離子對色譜級]MAVS (D5A9E) Rabbit mAbPhospho-cdc2 (Tyr15)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體

1-十三烷磺酸鈉[離子對色譜級]SirT1 (D739) AntibodyPhospho-cdc2 (Thr161)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體

十二烷基硫酸鈉[離子對色譜級]MALT1 AntibodyPhospho-cdc2 (Thr14)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體

(約0.5mol/L的溶液[離子對色譜級]NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb (PE Conjugate)Phospho-cdc2 (Ser39)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體

五氟酸(溶液中約0.5mol/L)[離子對色譜級]NCBP1/CBP80 (D7Z2Z) Rabbit mAbphospho-CD32B(Tyr291)  磷酸化CD32B抗體

七氟丁酸(溶液中約0.5mol/L)[離子對色譜級]SirT1 (C14H4) Rabbit mAbphospho-CD244(Tyr271)  磷酸化CD244抗體

九氟戊酸(溶液中約0.5mol/L)[離子對色譜級]SirT1 (C14H4) Rabbit mAbPhospho-CD19(Tyr531)  磷酸化CD19抗體

十一氟己酸(約5mmol)[離子對色譜級]LRRC8A/SWELL1 Antibodyphospho-CD19(Ser227)  磷酸化CD19抗體

十三氟庚酸(約5mmol)[離子對色譜級]FoxO3a (75D8) Rabbit mAbPhospho-CD18 (Ser756/Thr758/759)  磷酸化整合素β2抗體
嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒規格豬一氧化氮()ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

豬胰島素(INS)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

豬胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃50毫克

豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100克

豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

豬孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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