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當前位置:首頁  -  技術文章  -  貓血支原體PCR檢測試劑盒準備試劑與收集血樣

貓血支原體PCR檢測試劑盒準備試劑與收集血樣

更新時間:2023-04-26點擊次數:1410

貓血支原體PCR檢測試劑盒準備試劑與收集血樣:

雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。

2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

性能:

1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:檢測濃度小于0.1 U/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6個月

Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒RT-LAMP試劑盒

Alternaria spp.交鏈孢霉屬通用LAMP試劑盒

Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-LAMP試劑盒

Amidostomum anseri鵝裂口線蟲LAMP試劑盒

Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用LAMP試劑盒

Amycolata autotrophica自養無枝酸菌LAMP試劑盒

Anaplasma centrale 中央無漿體(無形體)LAMP試劑盒

Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)LAMP試劑盒

Anaplasma phagocytophilum嗜吞噬細胞無漿體(無形體)LAMP試劑盒

Anaplasma spp.無漿體(無形體)通用LAMP試劑盒

Ancylostoma duodenale十二指腸鉤口線蟲LAMP試劑盒

Anisakis spp.異尖線蟲屬LAMP試劑盒

Aphanomyces astaci變形絲囊霉菌LAMP試劑盒

Aphanomyces invadans侵入性絲囊霉菌流行性(潰瘍綜合癥病原)LAMP試劑盒

Arachnia propionica丙酸蛛網菌LAMP試劑盒

Arcanobacterium equi馬隱秘桿菌LAMP試劑盒

Arcanobacterium haemolyticum溶血隱秘桿菌LAMP試劑盒

Arcobacter spp.弓形桿菌屬通用LAMP試劑盒

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Arthrobacter equi馬節桿菌LAMP試劑盒

Arthrobacter spp.節桿菌通用LAMP試劑盒

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